Paradoksalna ekspresja dezaminazy adenozyny w limfocytach T wyhodowanych od pacjenta z niedoborem dezaminazy adenozyny i połączona z niedoborem odporności.

Limfocyty T hodowane od pacjenta (TD) z niedoborem deaminazy adenozyny (ADA) eksprymowały aktywność ADA w zakresie prawidłowym, niespójne z jej ciężkim niedoborem odporności, nieprawidłowościami metabolicznymi oraz z brakiem aktywności ADA w jej limfocytach B i innych jądrzastych komórkach hematopoetycznych. ADA z komórek TD TD miała normalny Km, stabilność cieplną i wrażliwość na inhibitory ADA. Badanie fenotypu HLA i polimorficznych loci DNA wykazało, że TD nie jest chimeryczną ani genetyczną mozaiką. Amplifikowany i subklonowany cDNA ADA z komórek T ADA + TD pokazano na podstawie hybrydyzacji swoistej dla allelu oligonukleotydu, aby uzyskać te same mutacje (Arg101 —- Trp, Arg211 – His) uprzednio znalezione w linii komórkowej ADA-TD B GM 2606 (Akeson, AL, DA Wiginton, MR Dusing, JC States, i JJ Hutton, 1988. J. Continue reading „Paradoksalna ekspresja dezaminazy adenozyny w limfocytach T wyhodowanych od pacjenta z niedoborem dezaminazy adenozyny i połączona z niedoborem odporności.”

Biosynteza w wazopresyny in vitro i ultrastruktura raka oskrzela: PACJENT Z ZESPOŁEM SEKWENCYJNEGO WYKRYWANIA HORMONU ANTYIDIURETYCZNEGO

Stwierdzono, że nowotwory od pacjentów z zespołem niewłaściwego wydzielania hormonu antydiuretycznego (SIADH) zawierają duże ilości wazopresyny, antydurektycznego hormonu. Nowotwór płuc od pacjenta z hiponatremią najprawdopodobniej spowodowany SIADH został usunięty podczas zabiegu chirurgicznego i stwierdzono, że zawiera on 23,5 mU wazopresyny / g mokrej masy za pomocą oznaczenia radioimmunologicznego. Plasterki tego nowotworu inkubowano z fenyloalaniną-3H. Argininowa wazopresyna-3H została oczyszczona z inkubatu przez chromatografię kolumnową Sephadex G-25 w dwóch różnych układach, utlenianie kwasem solnym i chromatografia kolumnowa z wymywaniem gradientowym z dietyloaminoetylo-Sephadex. Ponieważ utlenianie wazopresyny powoduje drastyczną zmianę konformacyjną z przerwaniem pierścienia cyklicznego polipeptydu i dodaniem dwóch reszt kwasu cysteinowego w cząsteczce, materiał radioaktywny eluowany jednocześnie z wazopresyną zarówno przed, jak i po tej procedurze został uznany za wazopresynę argininy-3H . Continue reading „Biosynteza w wazopresyny in vitro i ultrastruktura raka oskrzela: PACJENT Z ZESPOŁEM SEKWENCYJNEGO WYKRYWANIA HORMONU ANTYIDIURETYCZNEGO”

Ludzka cecha piebaldowa wynikająca z dominującego negatywnego zmutowanego allelu genu receptora błonowego c-kit.

Ludzka cecha piebaldu jest autosomalnym dominującym defektem w rozwoju melanocytów, charakteryzującym się plamami hipopigmentacji skóry i włosów. Chociaż molekularne podstawy skowronków są niejasne, fenotypowo podobne dominujące plamienie myszy jest spowodowane mutacjami w mysim c-kit protoonkogenem. W związku z tym odnotowano jeden przypadek srokawki z mutacją punktową i drugą z delecją c-kit, chociaż nie można wykluczyć polimorfizmu lub zaangażowania ściśle związanego genu. Aby potwierdzić hipotezę, że sundelizm jest wynikiem mutacji w ludzkim genie, eksony c-kit zostały zamplifikowane przez reakcję łańcuchową polimerazy z DNA 10 dotkniętych pacjentów i zbadane pod kątem zmian nukleotydowych za pomocą analizy polimorfizmu jednoniciowej konformacji. U jednego osobnika z wariantem polimorfizmu jednoniciowej konformacji dla pierwszego egzonu kodującego domenę kinazy, sekwencjonowanie DNA wykazało mutację missense (Glu583 —- Lys). Continue reading „Ludzka cecha piebaldowa wynikająca z dominującego negatywnego zmutowanego allelu genu receptora błonowego c-kit.”

Clusterin promuje agregację i adhezję komórek nabłonka świń nerek.

Nie jest znana funkcja klusteryny, heterodimerycznej glikoproteiny istotnie indukowanej w uszkodzeniach nerek i innych narządach. Ponieważ uszkodzeniu nerek towarzyszą zmiany w przyczepności komórek, możliwe jest, że klasterina działa w celu promowania interakcji między komórkami a komórkami i substratami. W tym badaniu zawiesinę pojedynczych komórek nabłonka nerkowego (LLC-PK1) traktowano oczyszczoną ludzką klusteryną, co skutkowało agregacją komórek zależną od czasu i dawki. Mikroskopia elektronowa agregatów komórkowych wykazała połączenie komórkowe i tworzenie się światła. Aby określić wpływ klusteryny na adhezję komórek, płytki do hodowli tkankowej pokryto klasterinem, fibronektyną, PBS lub albuminą. Continue reading „Clusterin promuje agregację i adhezję komórek nabłonka świń nerek.”

Hodowane fibroblasty płuc izolowane od pacjentów z idiopatycznym włóknieniem płuc mają zmniejszoną zdolność do syntezy prostaglandyny E2 i ekspresji cyklooksygenazy-2.

Prostaglandyna E2 (PGE2) hamuje proliferację fibroblastów i syntezę kolagenu. W tym badaniu porównywano fibroblasty płuc izolowane od pacjentów z idiopatycznym włóknieniem płuc (F-IPF) oraz od pacjentów poddawanych operacjom chirurgii resekcyjnej w kierunku raka płuc (F-nl) pod względem ich zdolności do syntezy PGE2 i ich ekspresji i regulacji cyklooksygenazy ( COX). Podstawowa aktywność COX, oceniana przez ilościowe oznaczanie immunoreaktywnego PGE2 zsyntetyzowanego z kwasu arachidonowego, była dwukrotnie mniejsza (P <0,05) w F-IPF niż F-nl. W F-nl inkubacja z agonistami PMA, LPS lub IL-1 zwiększała aktywność COX i ekspresję białka indukowalnej formy COX, COX-2, a te odpowiedzi były hamowane przez koinkubację z deksametazonem. Przeciwnie, F-IPF nie wykazał wzrostu ekspresji białka COX-2 lub aktywności COX w odpowiedzi na tych agonistów. Continue reading „Hodowane fibroblasty płuc izolowane od pacjentów z idiopatycznym włóknieniem płuc mają zmniejszoną zdolność do syntezy prostaglandyny E2 i ekspresji cyklooksygenazy-2.”