Przeciwciała przeciwko rekombinowanej ludzkiej erytropoetyny u pacjenta z niedokrwistością oporną na erytropoetynę

Casadevall i in. (Wydanie z 7 marca) opisał rozwój autoprzeciwciał przeciwko erytropoetynie u pacjenta z czystą aplazją komórek czerwonych. Autorzy zgłaszają obecność przeciwciał IgG przeciwko endogennej erytropoetyny, ale istnieje niewiele doniesień na temat przeciwciał przeciwko rekombinowanej ludzkiej erytropoetynę (rHuEPO) .2-4
Figura 1. Figura 1. Ocena przeciwciał anty-rHuEPO. Continue reading „Przeciwciała przeciwko rekombinowanej ludzkiej erytropoetyny u pacjenta z niedokrwistością oporną na erytropoetynę”

BiałaczkaNeoplastic Diseases of the Blood

Pierwsze wydanie Białaczki, wydane przez Grune i Stratton w 1958 roku, było pionierskim opisem dwóch wybitnych hematologów, Williama Damesheka z Bostonu i Freda Gunza z Christchurch w Nowej Zelandii, o pochodzeniu białaczki, przejawach jej różnych form i jego leczenie. Obszernie ilustrowany fotomikrografiami, radiogramami i wspaniałymi akwarelami komórek białaczkowych autorstwa profesora Kawakity z Kumamoto City w Japonii, białaczka jest kamieniem milowym w literaturze hematologicznej. Liczne notatki i ciężkie podkreślenia w moim egzemplarzu świadczą o ekscytacji wywołanej przez książkę w młodszym hematologu, który usiłował zrozumieć, co było wtedy nieuleczalną chorobą. Napisany 40 lat temu, białaczka nie wspomina o onkogenach, cytogenetyce, chemioterapii skojarzonej lub transplantacji szpiku kostnego. Mimo to nadal warto przeglądać, choćby ze względu na jego piśmienny styl, cywilizowany ton i poglądy humanitarne – połączenie rzadko spotykane w nowoczesnych podręcznikach. Continue reading „BiałaczkaNeoplastic Diseases of the Blood”

Rola interleukiny-10 w dysfunkcji komórek pomocniczych T u bezobjawowych osób zakażonych ludzkim wirusem niedoboru odporności.

Utrata czynności limfocytów T (TH) u bezobjawowych osobników zakażonych HIV typu występuje przed spadkiem limfocytów T CD4 +. Co najmniej część utraty funkcji TH wynika ze zmian w profilach immunoregulacyjnych cytokin. Aby zbadać rolę IL-10 w takim rozregulowaniu, zbadaliśmy, czy: (a) ekspresja specyficznego dla IL-10 mRNA będzie podwyższona w PBMC od osób bezobjawowych, zakażonych wirusem HIV (HIV +); (b) PBMC od tych samych osób wytwarzałoby zwiększone poziomy IL-10 po stymulacji in vitro za pomocą fitohemaglutyniny; i (c) wadliwa specyficzna względem antygenu funkcja TH mogłaby zostać przywrócona przez przeciwciało anty-IL-10. Zaobserwowaliśmy, że specyficzny wobec IL-10 mRNA był nieznacznie zwiększony w górę, a zwiększone poziomy IL-10 były wytwarzane przez PBMC od osób HIV + w porównaniu z PBMC od niezakażonych osobników. Osoby, których funkcja TH była bardziej upośledzona, wytworzyły wyższe poziomy IL-10. Continue reading „Rola interleukiny-10 w dysfunkcji komórek pomocniczych T u bezobjawowych osób zakażonych ludzkim wirusem niedoboru odporności.”

Ludzka cecha piebaldowa wynikająca z dominującego negatywnego zmutowanego allelu genu receptora błonowego c-kit.

Ludzka cecha piebaldu jest autosomalnym dominującym defektem w rozwoju melanocytów, charakteryzującym się plamami hipopigmentacji skóry i włosów. Chociaż molekularne podstawy skowronków są niejasne, fenotypowo podobne dominujące plamienie myszy jest spowodowane mutacjami w mysim c-kit protoonkogenem. W związku z tym odnotowano jeden przypadek srokawki z mutacją punktową i drugą z delecją c-kit, chociaż nie można wykluczyć polimorfizmu lub zaangażowania ściśle związanego genu. Aby potwierdzić hipotezę, że sundelizm jest wynikiem mutacji w ludzkim genie, eksony c-kit zostały zamplifikowane przez reakcję łańcuchową polimerazy z DNA 10 dotkniętych pacjentów i zbadane pod kątem zmian nukleotydowych za pomocą analizy polimorfizmu jednoniciowej konformacji. U jednego osobnika z wariantem polimorfizmu jednoniciowej konformacji dla pierwszego egzonu kodującego domenę kinazy, sekwencjonowanie DNA wykazało mutację missense (Glu583 —- Lys). Continue reading „Ludzka cecha piebaldowa wynikająca z dominującego negatywnego zmutowanego allelu genu receptora błonowego c-kit.”

Hamowanie aktywności enzymu konwertującego angiotensynę w hodowanych komórkach śródbłonka przez niedotlenienie.

Komórki śródbłonka w hodowli tkankowej degradują bradykininę i przekształcają angiotensynę I w angiotensynę II. Są to obie funkcje pojedynczej hydrolazy dipeptydylowej, enzymu konwertującego angiotensynę. Hodowle monowarstwowe przygotowano z naczyń ludzkich, króliczych, świni i cieląt. Aktywność enzymu konwertującego angiotensynę oceniano przez dodanie bradykininy lub angiotensyny I do komórek w kolbach hodowlanych i pomiar resztkowego peptydu w czasie za pomocą testu radioimmunologicznego. Degradacja peptydu była hamowana przez specyficzny inhibitor enzymu konwertującego, SQ 20881. Continue reading „Hamowanie aktywności enzymu konwertującego angiotensynę w hodowanych komórkach śródbłonka przez niedotlenienie.”

Dowody na bezpośrednie działanie cholekalcyferolu i 25-hydroksycholekalcyferolu na nerkowy transport fosforanu, sodu i wapnia

Przeprowadzono badania ostrego klirensu u psów stabilnych z niedoczynnością tarczycy, w celu oceny możliwości bezpośredniego działania nerek witaminy D i jej biologicznie aktywnego 25-hydroksylowanego metabolitu. Zmiany w hemodynamice nerkowej i stężenie wapnia w surowicy zostały zminimalizowane, a próby zmniejszenia poziomu witaminy D nie zostały podjęte. Zwiększenie objętości w stanie stacjonarnym w niewielkim stopniu zastosowano jako kontrolną sytuację eksperymentalną, tak że wpływ witaminy na zwiększenie reabsorpcji fosforanu nie zostałby niewykryty z powodu już największej reabsorpcji fosforanowej wtórnej do paratyroidektomii. W tych warunkach eksperymentalnych 10 000 U cholekalcyferolu i 25-120 U 25-hydroksycholekalcyferolu (25-HCC) spowodowało znaczne obniżenie odsetka przefiltrowanego fosforanu wydalonego (średnie spadki odpowiednio 39 i 47%), których nie można było przypisać zmiany w hemodynamice nerkowej lub zmiany stężenia wapnia lub fosforanu w surowicy. Wystąpił towarzyszący spadek wydalania sodu i wapnia; średnie odsetki wydalania sodu spadły o 38% dla witaminy D i 26% dla 25HCC, a dla wapnia pomiar ten zmniejszył się odpowiednio o 46 i 23%. Continue reading „Dowody na bezpośrednie działanie cholekalcyferolu i 25-hydroksycholekalcyferolu na nerkowy transport fosforanu, sodu i wapnia”

Funkcję płucnych receptorów muskarynowych M2 u świnek morskich prowokowanych antygenem przywracają heparyna i poli-L-glutaminian.

Wpływ heparyny i poli-L-glutaminianu na funkcję hamujących autoreceptorów muskarynowych M2 na nerwy przywspółczulne w płucach badano na świnkach morskich prowokowanych antygenem. Po prowokacji antygenem zmniejsza się funkcja receptora M2, zwiększając w ten sposób uwalnianie acetylocholiny z nerwu błędnego i nasilając skurcz oskrzeli wywołany przez wagę. Świnki morskie zostały znieczulone, poddane tracheostomii, wagomizowane, sparaliżowane i wentylowane. Elektryczna stymulacja vagiego spowodowała skurcz oskrzeli i bradykardię. W grupie kontrolnej, pilokarpina osłabiała wywołane przez układ nerwowy skurcz oskrzeli, stymulując neuronowe receptory muskarynowe M2. Continue reading „Funkcję płucnych receptorów muskarynowych M2 u świnek morskich prowokowanych antygenem przywracają heparyna i poli-L-glutaminian.”

Blokada wytwarzania C5a i C5b-9 hamuje aktywację leukocytów i płytek podczas krążenia pozaustrojowego.

Aktywacja dopełniacza przyczynia się do ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej wywołanej przez krążenie sercowo-płucne. Na poziomie komórkowym krążenie sercowo-płucne aktywuje leukocyty i płytki krwi; jednakże udział wczesnych (3a) w stosunku do późnych (C5a, rozpuszczalne C5b-9) składników dopełniacza do tej aktywacji jest niejasny. Zastosowaliśmy model symulowanej pozaustrojowej cyrkulacji, która aktywuje dopełniacz (tworzenie C3a, C5a i C5b-9), płytki krwi (zwiększony odsetek dodatnich dla P-selektyny płytek i koniugatów leukocytów z płytkami krwi) i neutrofile (podwyższona ekspresja CD11b). w celu specyficznego ukierunkowania aktywacji dopełniacza w tym modelu, dodaliśmy blokujące mAb skierowane na ludzki składnik dopełniacza C5 i oceniono jego wpływ na dopełniacz i aktywację komórkową. W porównaniu z kontrolą mAB, przeciwciało przeciw ludzkiemu C5 głęboko zahamowało wytwarzanie C5a i rozpuszczalnego C5b-9 oraz aktywność hemolityczną dopełniacza w surowicy, ale nie miało wpływu na wytwarzanie C3a. Continue reading „Blokada wytwarzania C5a i C5b-9 hamuje aktywację leukocytów i płytek podczas krążenia pozaustrojowego.”

Zmieniono aktywność cyklazy adenylanowej i nieprawidłowości białka G w królikach z nadciśnieniem wrotnym.

Nadciśnienie wrotne (PHT) charakteryzuje się przekrwieniem splanchnickim z powodu zmniejszenia oporu naczyniowego krezkowego. Postawiliśmy hipotezę, że zmiany aktywności białka regulatorowego guaniny i nukleotydu (białka G) mogą być częściowo odpowiedzialne za wyraźne zaburzenia krążenia obserwowane w PHT. W związku z tym ustaliliśmy zmiany w układzie cyklazy adenylanowej / cAMP u królików z nadciśnieniem w okresie przedhepatycznym i skorelowaliśmy te zmiany z aktywnością białka G. Aktywności cyklazy adenylowej stymulowane podstawowym i G-białkiem były niższe w tętnicach krezkowych górnej (PH 22-26%) i w aorcie piersiowej (31-46%), ale wyższe (178-321%) w żyle wrotnej. Aktywność funkcjonalna białek Gi alfa (zależna od toksyny zależnej od ADP rybosylacja) zwiększyła się w górnej tętnicy krezkowej i aorcie piersiowej PHT, ale zmniejszyła się w żyle wrotnej. Continue reading „Zmieniono aktywność cyklazy adenylanowej i nieprawidłowości białka G w królikach z nadciśnieniem wrotnym.”

Przegrupowanie genu beta receptora beta komórek T dzielone przez mysie linie komórek T pochodzące z miejsca autoimmunologicznego stanu zapalnego.

Postępy w naszej wiedzy na temat struktury i biologii molekularnej receptora antygenów limfocytów T umożliwiły teraz badanie ludzkich chorób autoimmunologicznych za pomocą nowych metod. Jednym z takich podejść jest klonowanie komórek T z miejsc patologii autoimmunologicznej, a następnie identyfikacja przypuszczalnej, powiązanej z chorobą oligoklonalności komórek T, na poziomie przegrupowań receptorów komórek T. Przetestowaliśmy teraz wykonalność tego podejścia w zwierzęcym modelu autoimmunizacji, mysiego eksperymentalnego alergicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego (EAE). Rdzeniowe linie komórkowe i subliny pochodzące z rdzenia kręgowego, samo (mysich) białek mieliny z zasadowym białkiem mielinowym (MBP) analizowano na poziomie ich przegrupowań w łańcuchu beta receptora przy użyciu Southern blot. Obecnie donosimy, że linie komórkowe T-zależne od MBP i subliny pochodzące z rdzeni kręgowych czterech z pięciu myszy SJL / J z EAE mają podział 14,5-kb przegrupowanego beta-receptora beta-komórkowego na prążki Southern. Continue reading „Przegrupowanie genu beta receptora beta komórek T dzielone przez mysie linie komórek T pochodzące z miejsca autoimmunologicznego stanu zapalnego.”